Radioimunní analýza v mikrobiologii: aplikace, mechanismus

Moderní medicína má specifické metody diagnózy, které umožňují nastavit etiologii onemocnění, ve které se podle určení patogenu geneticky cizích látek, které stimulují imunitní reakce, nukleových kyselin u lidí, a také posouvá imunitní a alergické povahy, které se vyskytují v důsledku jeho působení. Dnes v imunologii a virologii široce používané RIA, které je radioimunozkouška, stanovení cílů, komponenty, mrtvice, uchetkotorogo se podíváme v tomto článku. Tento test je schopen detekovat antigeny v důsledku jejich interakce s protilátkami.

Definice

RIA je způsob diagnostikování takových biologicky aktivních látek v tělních tekutinách, které je založena na reakci antigen-protilátka s použitím sloučenin značených radionuklidy analogickým, které mají specifickou vazebnou systém. Následovat jejich interakce vytvořeného imunitního komplexu, který se oddělí a její radioaktivita byla studována. To je známo radioimunoanalýza se provádí za použití standardních sestav činidel.

Každé činidlo je schopno určit koncentraci jedné konkrétní látky. Biologická tekutina převzat z člověka se smísí s činidlem, po inkubační době, separace volného a vázaného radioaktivního materiálu dále provádí radiometrické a výpočet výsledků. U látek, které používají izotopových štítky jodu. Označuje se a přidává se v určitém množství.

Aplikace

Aplikace radioimunologického testu má širokou oblast medicíny a mikrobiologie. S jeho pomocí se provádí diagnostika srdečních a cévních onemocnění, onemocnění endokrinních a dalších tělesných systémů. RIA se také často používá k identifikaci příčiny neplodnosti, patologie vývoje plodu. V onkologii se tato analýza provádí k určení markerů novotvarů, aby bylo možné sledovat účinnost léčby. V imunologii se RIA používá k vyšetření přítomnosti imunoglobulinů, enzymů, proteinů a tak dále v krvi. Dnes tato analýza umožňuje určit koncentraci různých hormonů na miliontinu na gram. Tímto způsobem, radioimunoanalýzaširoce používaný v kardiologii, onkologii, endokrinologii, gynekologii a virologii.

Metody RIA

Je přijatelné rozlišit několik metod analýzy v závislosti na povaze reakce:

1. Nekonkurenční metoda je charakterizován takovými reakčními složkami jako standardními a detekovatelnými antigeny, pufrovým roztokem, protilátkami, které jsou značeny izotopem, určitými protilátkami, které se vážou na sorbent. Antigen se přidává k protilátkám, které se vyšetřují. Po inkubaci se objevují komplexy antigen-protilátka, sorbent se promyje, přidá se značené protilátky, které se váží na antigen v komplexu. Radioaktivita závisí na koncentraci antigenu, který je zkoumán.
2. Konkurenční radioimunoanalýza je způsobena konkurencí antigenů. K dispozici jsou reakční složky, jako je kontrola a definovaných antigenů, roztokem pufru, specifické protilátky, které se vážou k sorbentu, jakož i antigenu značeného izotopem. Diagnóza začíná injekcí antigenu, který se zkoumá. Na sorbentu vzniká komplex antigen-protilátka. Potom se sorbent promyje a zavede se značený antigen. V tomto případě přichází do kontaktu s protilátkou. Pomocí čítačů se měří reakce a radioaktivita. Bude to v inverzním poměru k množství antigenu ve vzorku.
3. Nepřímé metody je nejběžnější. V tomto případě radioimunní analýza komponent Reakce má jako kontrolní a testovací sérum, antigeny nebo protilátky, které jsou navázány na sorbent, protilátky značené izotopy, pufrové roztoky. Protilátky nebo antigeny, které jsou diagnostikovány, reagují s antigeny nebo protilátkami, které jsou navázány na sorbent. Pak se inkubát odstraní, zavedou se značené protilátky, které se váží na komplexy antigen-protilátka.

Metoda analýzy

Takže radioimunní analýza se provádí pomocí speciálních činidel. Sady jsou standardní, takže chyby nebo nesrovnalosti nejsou povoleny. Výsledky diagnózy jsou spolehlivé. Analýza se provádí ráno, za tím účelem osoba vezme žilní krve. V laboratoři je sérum odděleno od krve, které bude použito pro RIA. Toto sérum se mísí s činidly. Výsledná směs se inkubuje v dané teplotě v termostatu.

Výsledná směs se oddělí volnými a vázanými izotypy. Poté se přezkouší přijatý materiál a vypočítají se výsledky. Mechanismus radioimunologického testu má několik variant. Postup popsaný výše je kapalná fáze RIA, protože všechny složky mají kapalný stav. Existují RIA a pevná fáze, kde jsou protilátky umístěny v nosiči, který se v kapalině nerozpouští.

Dostupnost diagnostiky

Používání této metody diagnostiky v medicíně je stále více populární. V poslední době, radioimunoanalýza se stává standardní metodou diagnostiky, kterou může stanovit lékař při konečné diagnostice. Tento typ analýzy byl po dlouhou dobu prováděn pouze v laboratořích, dnes se stala běžnou metodou výzkumu. RIA však vyžaduje použití drahého zařízení (gama-čítače) a sady reagencií mají krátkou provozní dobu. To vše je hlavní nevýhodou takové analýzy, která určuje její drahé náklady.

Navíc, nedávno RIA začala vytěsňovat moderní metody výzkumu, které nevyžadují interakci s izotopy. Takové obavy enzymová imunotest. RIA je tedy v mnoha klinikách vítána. Ve velkých městech a diagnostických centrech se už dlouho používá, ale v běžných nemocnicích v malých městech se tato analýza téměř nevyužívá kvůli vysokým nákladům.

Výhody RIA

Radioimunní analýza má mnoho výhod. Je poměrně specifická a má vysokou citlivost, která umožňuje zjistit přítomnost biologicky aktivních látek v neuvěřitelně malých množstvích. Tato analýza je velmi jednoduchá, od člověka se vyžaduje, aby prošla žilní krví. Výsledky testů jsou 100% přesné a připraveny následující den. RIA lze také snadno automatizovat. Tato analýza nám tedy umožňuje identifikovat proteiny, které jsou produkty životně důležité aktivity infekčních bakterií, což naznačuje přítomnost infekce v těle.

Diagnostika v virologii

Nejslibnější RIA je pro virologii, protože umožňuje v krátké době identifikovat virové patogeny. To je způsobeno skutečností, že v poslední době vzrůstá výskyt různých infekcí, které se šíří vysokou rychlostí a způsobují smrt mezi lidmi. Platí to zejména pro země, které nemají vysoký společenský a hospodářský rozvoj (Dálný východ), je zde prostě nenahraditelná radioimunoanalýza. Mikrobiologie Aplikuje také tuto diagnostickou metodu k detekci infekčních onemocnění, které způsobují patogenní bakterie. Například, RIA je široce používán k detekci břišní tyfus. V prvních dnech onemocnění před zahájením léčby je nutné provést studii o stolici a zvracení. Výsledky diagnózy však budou po dlouhé době dosaženy. Zde RIA přijde na záchranu, analýza umožňuje identifikovat patogenní chorobu v krátkém čase. Osoba dává krev, další den jsou výsledky studie již hotové. Tato analýza pomáhá při formulování přesné diagnózy.

Výsledky

Radioimunoanalýza je v současnosti jednou z nejcitlivějších diagnostických metod. Používá se k analýze jakékoli látky, proti které se mohou vytvářet protilátky. Tato metoda umožňuje vytvářet spoustu vzorků v nejmenším objemu zkoumané kapaliny a také zaznamenávat výsledky v co nejkratší době, protože může být plně automatizovaná. Tato analýza byla vytvořena v padesátých letech minulého století Šalomounem Bersonem. O třicet let později se rozšířila. K dnešnímu dni nemá RIA sto procentní alternativu, protože analýza má vysokou citlivost. RIA se používá v různých oborech medicíny, stejně jako v mikrobiologii a virologii.

Konečně

Použití metody v virologii je dnes velmi důležité, neboť poskytuje příležitost vyšetřit šíření infekcí, provést přesné stanovení diagnózy a předepisovat konkrétní léčbu. Zvláště tento problém je relevantní pro země, které mají nízkou úroveň ekonomiky a sociálního rozvoje. Také tato analýza umožňuje identifikovat počet hormonů a enzymů v lidském těle. Za účelem získání spolehlivých výsledků má vyšetřovatel pouze krev pro analýzu. Lékařství nehybně stojí, společně s radioimunoanalýzou se objevují nové metody výzkumu, ale RIA je i nadále jedním z vedoucích v lékařské diagnostice.