Tinktorální vlastnosti - základ mikroskopie bakterií

Rozmanitost bakteriálních infekcí vyžaduje jasnou identifikaci patogenu a definici jeho druhu. Určení typu mikrobiologických mikroorganizmů pomáhají jeho tinkturální vlastnosti - citlivost mikrobu na barvení různými barvivy. Tato metoda vám umožní prozkoumat morfologii patogenu. Klinické vlastnosti bakterií mají velký význam pro praktický a teoretický výzkum v oblasti mikrobiologie.

Vyšetřování mikrobů

V bakteriologii existuje mnoho způsobů barvení mikroorganismů. Všechny jsou založeny na baktericidních vlastnostech bakterií. Barvení umožňuje určit jejich tvar, strukturu, velikost, relativní pozici. To umožňuje řešit problémy systematizace mikroorganismů obecné biologie a srovnávací mikrobiologie.

Proč je namalovat?

Bakterie jsou prakticky průhledné organismy a bez použití barvení jsou pro běžnou mikroskopii špatně viditelné. Můžete použít speciální typy mikroskopie (fázový kontrast v tmavém poli) pro studium objektů, ale nejsnazší je barvení, po kterém se bakterie stanou viditelnými v konvenčním světelném mikroskopu.

Příprava vzorků

Bez ohledu na použitou barvicí techniku ​​existují jednotná pravidla pro přípravu studovaného předmětu. Povinné jsou následující fáze:

• Sterilní nástroje dělají skvrnu na snímku.
• Vzorek se suší. To se provádí při pokojové teplotě nebo pomocí sušicích skříní.
• Pak následuje fáze fixace - mikroorganismy se připevňují ke sklu se speciálními kompozicemi.
• Skutečné zafarbení - vzorek je pokrytý barvivem po určitou dobu, po které je promyt.
• Konečné sušení - vzorek se znovu vysuší.
  

Nejběžnější barviva

Nejčastěji používané barviva na bázi anilinu s různými hodnotami kyselin (pH). Většina barviv je prášek, který se chová v alkoholu.

Barviva, u kterých jsou barvicí činidla kationty, se nazývají zásaditá (pH větší než 7). Mohou být použity pro barvení mikroorganismů červeně (purpurová, Safraninem), purpurové (metilviolet, thionin), modrá (methylenová modř), zelené (malachitové zeleně), hnědá (získat chrysoidine) a černé (Indulin) barvy.

Barviva, jejichž barvivy jsou anionty, se nazývají kyselinou (pH menší než 7). Budou barvit vzorek v barvě červené (eosin), žluté (picrin) nebo černé (nigrosine).

Existuje skupina neutrálních barviv (například rodaminu B), kde barviva jsou kationty a anionty.

Kultura je živá nebo mrtvá

Metody barvení jsou rozděleny do dvou skupin podle životní formy testovaného vzorku.

• Vitalní (intravitální) barvení. Tato metoda studia vlastností mikroorganismů se používá při studiu živých tkání, což umožňuje pozorovat procesy života mikrobů. Pro takové barvení se používají barviva s nízkou toxicitou a vysokou pronikavou silou.
• Postestalova barvení. Toto je barvení mrtvých nebo usmrcených mikroorganismů. Vzhledem k tinkturálním vlastnostem bakterií určují mikrobiologové jejich strukturu. Toto zbarvení se používá nejčastěji.

Gram-pozitivní a gramnegativní

To jsou tyto vlastnosti bakterií, které lze nalézt v pokynech pro různé léky. Tato metoda studia bakterií bakterií je založená na použití barviva hořčice a fixace jódu. To je technika Hanse Christiana Grama, dánského lékaře, který ho navrhl v roce 1884. Výsledkem tohoto barvení jsou bakterie rozděleny do dvou skupin:

• Gram (+) - barvené modré (stafylokoky a streptokoky).
• Gram (-) - jsou zbarveny v barvě růžové až červené (enterobakterie, salmonella, E. coli).

Jiný výsledek zbarvení je získán z důvodu nerovných tinkturálních vlastností bakteriálních stěn. Metoda zbarvení Grama a dnes je hlavní v diagnostice některých infekčních onemocnění.

Jiné metody barvení

Pojďme popsat vlastnosti několika dalších metod, které se v bakteriologii běžně používají.

• Metoda Tsilya-Nelson - určuje kyselou odolnost bakterií. Identifikuje příčinné činitele tuberkulózy a mykobakteriózy.
• Metodika Romanovský-Giemsa - skvrn acidophilus (kyselina octová a kyselina mléčná), bakterie v červené a bazofilních (spirochet a protozoa) - modrá.
• Morozovova metoda - znečišťuje bakterie v hnědé barvě a rozezní jejich stopky.

Můžete vidět spory

Barvení s fucinem Zilya umožňuje vidět spory bakterií. Po zbarvení růžové barvy jsou jasně viditelné na pozadí modrých bakterií. Tato metoda je také nástroj bakteriologie a má velký praktický význam.