Fluorescenční mikroskopie: studijní charakteristiky

Termín "mikroskopie" má řecké kořeny. V překladu to znamená studium předmětů používajících vysoce přesné nástroje. V poslední době stále více a více populární oceli luminiscence a elektronové mikroskopie

Rozlišení

Pod ní zpravidla rozumí minimální vzdálenost, na které lze jasně odlišit objekty. Rozlišení zařízení určuje stupeň průniku do mikroskopického světa, možnost uvažovat o velikosti vyšetřovaného prvku. S velkým nárůstem hranic objektů lze sloučit. Existují tedy určité limity, za kterými je aproximace prvků bezvýznamná.

Metoda luminiscenční mikroskopie: mechanismus

Při přeměně energie absorbované látkou v viditelné záření tam je záře. Říká se tomu luminiscence. Tento jev vyplývá ze skutečnosti, že některé látky pod vlivem světla začnou vydávat paprsky s jinou (obvykle velkou) vlnovou délkou. Kromě toho některé objekty, které mají pod normálním osvětlením určitou barvu, pod vlivem ultrafialového světla mění svou barvu.

Specificita

Objekt, který nelze vidět v ultrafialovém světle, může vyzařovat jasný lesk, pokud je ošetřen speciální látkou. V něm prvky lesknou v temnotě v různých barvách. Radiační výkon je jiný, ale zpravidla je malý. V tomto ohledu je fluorescenční mikroskopie účinná v tmavé místnosti. Při použití tohoto druhu výzkumu je objekt sledován ve světle, které sám vyzařuje. Chemické složení tkání, buněk ovlivní kvalitu studie. Luminiscenční mikroskopie je do jisté míry považována za histochemickou studii.

Klasifikace

Fluorescenční mikroskopie může být primární nebo sekundární. Ve druhém případě je předmět zpracováván speciálními látkami, které dávají záře. Primární fluorescenční mikroskopie je založen na vnitřní schopnosti studovaného prvku vyzařovat světlo.

Zařízení

Luminiscenční mikroskopie se provádí pomocí různých přístrojů. Osvětlovač slouží jako hlavní prvek. Je vybaven ultrafialovou lampou. Zařízení navíc používají sadu filtrů. V některých zařízeních existuje spousta různých konfigurací. V závislosti na barvě používané k excitaci luminiscence - ultrafialové nebo modré, je vhodný filtr umístěn mezi zdroj světla a studovaný předmět. Vzhledem k tomu, že záření mikroskopického prvku je energeticky slabší než vzrušující světlo, bude zachyceno pouze za jednoho stavu. Přebytek paprsků pocházejících ze zdroje musí být odříznut žlutozeleným filtrem. Je umístěn na okuláru přístroje. Nejvýraznější účinek luminiscence bude, když filtr zcela odřízne paprsky vystupující ze zdroje světla.

Co znamená instalace z viditelného záření? Má jasný zdroj světla a biologický mikroskop. Mezi zrcadlem zařízení a lampou je instalován modrofialový filtr. Může to být FS-1, UFS-3 a tak dále. Žlutý filtr je umístěn na okuláru mikroskopu. S jejich pomocí na objekt padne modrofialové světlo. On také vzrušuje luminiscenci. Toto světlo však může narušit vidění záře. Proto na cestě k oku je odříznut žlutým filtrem. Osvětlení je nastaveno podle Kohlerovy metody, s jednou výjimkou. Membrána kondenzátoru musí být zcela otevřena. Ve studii je důležité používat nefluorescenční ponorný olej. Pro snížení vlastních emisí se přidá nitrobenzen (2-10 kapek / 1 g).

Luminiscenční mikroskopie: aplikace v mikrobiologii

Výhody tohoto typu výzkumu jsou:

1. Možnost získání barevných obrázků.
2. Vysoká kontrastová úroveň samoudících prvků na černém pozadí.
3. Detekce a detekce lokalizace jednotlivých druhů virů a mikrobů.
4. Možnost studovat průhledné a neprůhledné živé organismy.
5. Studium životních procesů v jejich dynamice.

Rovněž je třeba říci, že luminiscenční mikroskopie přispívá k vývoji nejlepších metod histo- a cytochemie, rychlé diagnostiky.