Středa Ploskirev (Bactoagar F): popis. Lékařská mikrobiologie

Prostředí Ploskirev (také nazývané Bactoagar G) je živné médium

Historie

Nikolaj Ivanovič Ploskirev je sovětský mikrobiolog a ctihodný doktor RSFSR. Narodil se v roce 1869 a zemřel v roce 1948, většinu svého života pracoval ve svém rodném městě Tomsk.

V roce 1888, on, budoucí vědec, nedokončil šestý ročník školy, vstoupil do vojenské služby. Svůj studijní pobyt ukončil až v roce 1892, poté absolvoval zkoušky na přijetí na Imperial Tomsk University, studoval na Lékařské fakultě. V roce 1898 získal titul lékaře.

Ploskirev se účastnil rusko-japonské války a poté pracoval v nemocnici v Tomsku. V roce 1910 byl jmenován vedoucím Tomskové dermatovenerologické nemocnice a třicet let byl jeho stálou hlavou. Podobně vědec byl jedním ze zakladatelů dermatologického a venereologického dispenzáře v Tomsku.

Nikolaj Ivanovič Ploskirev napsal řadu děl věnovaných boji proti pohlavním chorobám.

Složení

Středa Ploskirev - materiál pro kultivaci střevních bakterií, a proto by měl obsahovat několik druhů živin. Vyrábí se v suché formě.

Pankreatický hydrolyzát šproty (10,4 g / l) má spíše velký podíl na celkové hmotnosti. Méně méně je nutné pro hydrogensitrát sodný (8,5 g / l). Obsahuje také suchou výživnou půdu a mléčný cukr (8,62 a 7,3 g / l).

Druhým názvem pro prostředí Ploskirev je Bactoagar J. Obsahuje agar v množství 6,94 g / l. Obsah bezvodého síranu sodného se rovná 5,1 g / l. Přítomnost dehydratovaného fosforečnanu dvojsodného - 2,1 g / l, sodných solí žlučových kyselin asi 3,46 g / l a 2,4 g uhličitanu sodného.

Méně gram obsahuje indikátory - neutrální červená (0,05) a brilantně zelená (0,0002). Obsah jódu je 0,13.

Aplikace

Studium biochemických procesů bakterií hraje velmi důležitou roli v diagnostice nemocí, které způsobují anaerobní organismy. Druhy, které tvoří tuto rodinu, jsou stovky. Jsou téměř identické v morfologii a kulturních vlastnostech a nejspolehlivějším způsobem, jak je odlišit od sebe, je studium biochemie.

Studie začíná vysetáním patologického materiálu v živném médiu. Jedná se o diferenciálně-patologické pro střevní skupinu bakterií a její složení kromě agarového agarového masa zahrnuje indikátor a laktózu. Schopnost zpracovat laktózu je důležitým znakem diferenciace enterobakterií. Pokud je to zjištěno, pH se posune k kyselosti a indikátor, který znečišťuje kolonii, je spuštěn.

V jiných zemích lze použít jiné živné média, ale mechanismus jejich činnosti odpovídá třem nejběžnějším v Rusku - prostředí prostředí Endo, Levin a Ploskirev.

Popis metody

V zahraničí je ekvivalentem Ploskirevova prostředí tzv. MacConkey agar. V hotové podobě je roztok průhledný, má světle růžovo-žlutý odstín. Kolonie schopné zpracovat laktózu v Ploskirevově médiu jsou označeny červenou barvou (brusinkovou) barvu. Pokud bakterie nemůže zpracovat, kolonie je buď bezbarvá nebo má slabé barvy.

Vzhledem k tomu, že složení prostředí Ploskirev zahrnuje látky, které inhibují (diamantová zeleň, žlučové soli, jod), prakticky zcela potlačuje růst grampozitivní flóry a v první den významně inhibuje růst eshechirií, stejně jako ostatní běžně doprovázející mikroflóru.

Druhá fáze

Dále se uskuteční výběr kolonie, která je předmětem zájmu, a je zaseta do primárního rozlišovacího a akumulačního média. Média, na kterých dochází k vysetí, musí obsahovat několik substrátů. Bakteriální kultura by měla detekovat enzymatickou aktivitu směrem k nim, kromě toho, že média jsou umístěna ve zkumavkách, takže existují dvě části:

• na kterém je agar skloněn;
• se sloupcem.

Kolonie, která je zájmem výzkumného pracovníka, je osídlena na svažující se části s hustým mrtvici a ve sloupci - s prick. V této fázi se používají média Russell, Kligler nebo Olkenitsky. Jako diferenciální diagnostika se také používá Ploskirevovo médium.

Mikrobiologie a patogeny

Ploskirevův agar je důležitým faktorem při detekci infekcí způsobených enterobakteriemi. Například roste a rozlišuje kolonie mikroorganismů, které jsou příčinou bakteriální úplavice. Jedná se o anaerobní organismy, které vstupují do rodu Schigella.

Stejně jako všichni, kteří jsou součástí rodiny střevních bakterií, jsou Shigella druhy tyčinek o velikosti dvou mikrometrů. Nevytvářejí tobolky a spory, nemají vlasy - to umožňuje jejich odlišení od salmonely, která je mobilní. Dokonce rostou v nejjednodušším prostředí, při teplotě těsně nad pokojovou teplotou (35-37 ° C) a 7,4 pH. Vzhledem k povaze růstu se kolonie neliší od salmonel.

Jak bylo uvedeno výše, mikroorganismy nemohou mít prakticky žádné morfologické rozdíly, ale významně se liší v biochemických procesech životně důležité aktivity. Takže kromě Shigella Newcastle je fermentace sacharidů tvořena kyselinou bez plynu. S výjimkou shigella Sonne nemohou fermentovat laktózu, ale rozkládají glukózu. K jejich klíčovým vlastnostem lze připsat skutečnost, že mohou snížit niracy na dusitany. Jejich kolonie neodštěpují močovinu a v živném médiu nedochází ke zkapalnění želatiny.

Sběr a příprava inokula

K detekci patogenů dyzentrie je nutné provádět mikrobiologické studie infikovaných médií, tj. Pohybů střev pacienta. Po obdržení materiálu je nutné co nejdříve zasít. Pokud to není možné, zdroj by měl být umístěn v konzervační látce - fosfátová pufr nebo glycerin. Při teplotě 4 ° C je možné je skladovat déle než jeden den. Sběr materiálu musí být proveden pomocí rektální skleněné trubice, která je vložena do konečníku.

Pro zkoumání tohoto materiálu jsou vybrány purulentní sliznice, které musí být promyty ve dvou nebo třech zkumavkách izotonického roztoku chloridu sodného.

Aplikace patogenních bakterií do Ploskirevova média se provádí skleněnou stěrkou. Je nutné, aby se v malém prostoru třela do agaru, potom odtrhněte špachotu z média a zbytkový materiál by měl být nanesen do nezakryté plochy. Pokud se výsev provádí v několika šálcích, je nutné, aby každý z nich byl zasazen novou částí.

Pokud mukopurulentní kousky neexistují ve výluzích pro analýzu, neznamená to, že patogenní mikroorganismy tam nejsou. V takovém případě je nutné, aby emulgovat výkaly ve 10 ml roztoku chloridu sodného (koncentrace 0,85%) a pak zasít jednu nebo dvě kapky na médiu Ploskireva. Emulgovaná stolička se může vysévat v selenitovém bujónu. Používá se také v případě, že se místo výkaly objevují zvracení nebo voda.

Mikrobiologická diagnostika

V první fázi mikrobiologického výzkumu jsou patogenní bakterie naočkovány do dvou šálků a potom pozorovány, jak se šigela rozrůstá. Na Ploskirevově médiu se produkuje jedna plodina, druhá je na médiu Levin nebo Endo.

Vzhledem ke vzniku kmenů Shigella rezistentních na antibiotika se k médiu přidává levomycetin. Potom do 24 hodin probíhá inkubace v termostatu při teplotě 37 ° C.

Druhý den je třeba studovat dospělé kolonie. Ty, které nevyrůstají bezbarvé v diferenciálním diagnostickém prostředí, musí být odstraněny na Russellovo médium nebo krátkou "pestrou sérii". Další výzkum se provádí podle algoritmu primárních plodin na nich. Kolonie shigely na Ploskirevově médiu rostou ve formě průhledných, bezbarvých a malých sloupců. Jsou to dva typy:

• zploštělé ostré hrany;
• Zaoblená, konvexní, s charakteristickým vlhkým leskem.

Tři nebo čtyři kolonie musí být mikroskopovány a vyšetřeny na mobilitu. V případě, že se nenachází, jsou přesunuty do prostředí Olkenitsky, aby se vyčlenila čistá kultura. Při absenci charakteristických kolonií shigely nebo v případě, že vůbec neexistuje růst, je nutné produkovat selenitový vývar na agaru Endo nebo Ploskirev. Pokud jsou přítomné typické kolonie v dostatečném množství, je uvedena přibližná aglutinační reakce. Používá se směs sera Sonne a Flexner, reakce probíhá na skle.

Další výzkum

Třetího dne dochází ke změnám, ke kterým došlo v koloniích na médiu Russella. Je-li kultura, která nezhoršuje laktózy a glukózy fermentuje za vzniku kyseliny, se oddělí a analyzují, stráví mikroskopie, jakož i provádět setí v „pestré řadě,“ ale tentokrát rozšířen. Stačí dát aglutinační reakce, aby se sérologickou identifikací.

V poslední den můžete uzavřít závěr na základě změn v "pestré sérii" (zda probíhá fermentace sacharidů), stejně jako výsledky aglutinační reakce.

Skladování a příprava

Příprava Ploskirevova agaru je následující:

1. 55 g sušiny se míchá v litrech destilované vody.
2. Vařte dvě až tři minuty, až se agar úplně roztaví.
3. Nalijte do Petriho misky (sterilita je volitelná) s vrstvou 5-6 mm.
4. Šálky jsou ponechány otevřené hodinu a půl při pokojové teplotě (18-25 stupňů). Po uplynutí této doby médium dostatečně zmrazí a usuší.

Prostředí společnosti Ploskirev je citlivé na světlo a hygroskopické. Prášek musí být skladován v uzavřeném obalu, relativní vlhkost vzduchu v místnosti by neměla překročit 60%. Optimální skladovací teplota od 2 ° C do 25 ° C Je nutné dodržovat tato pravidla pro ukládání, jinak mohou dojít k nepřesným výsledkům výzkumu.